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顯微鏡觀察檢測(cè)魚(yú)病

        對(duì)魚(yú)身上的寄生蟲(chóng)觀測(cè)是檢測(cè)魚(yú)病的最要方法之一,一般采用鏡檢。用顯微鏡,解剖鏡,放大鏡對(duì)魚(yú)病進(jìn)行檢測(cè),簡(jiǎn)稱鏡檢。鏡檢是在魚(yú)病情況比較復(fù)雜,僅憑肉眼不能作出正確診斷時(shí)而進(jìn)行的更深層次的檢查。
        當(dāng)一尾病魚(yú)到手上時(shí),須先檢查外觀,是否有異常之處,例如是否有出血或是有寄生蟲(chóng)或是潰爛 .........等,翻開(kāi)鰓蓋以肉眼檢查鰓絲,觀察是否有異狀,到目前為止是一般魚(yú)友都可以自己做的工作,這些也是檢驗(yàn)病魚(yú)的最基本的工作。以肉眼觀察鰓絲后,剪下鰓絲以生物顯微鏡(新視窗顯微鏡效果更佳,可升級(jí),總放大倍數(shù)可達(dá)到2000倍)觀察,通常由低倍率開(kāi)始檢查是否有寄生蟲(chóng),或是做鰓絲抹片以染寄染色后以1000倍的由境觀察是否有大量異常的細(xì)菌出現(xiàn),但這只能作為參考,因?yàn)轹w絲上通常會(huì)有不少的細(xì)菌附著,因此很難斷定我們所觀察到的細(xì)菌就是引起疾病的病原。接下來(lái)將魚(yú)解剖觀察內(nèi)臟器官是否異常,例如是否有腹水,肝臟或脾臟是否腫大或出血,腸道是否異常積水。外部觀察后接下來(lái)就是要采 疾病原菌了,在實(shí)驗(yàn)室會(huì)將勾菌環(huán)燒紅冷卻后插入組織后劃于細(xì)菌用培養(yǎng)基上,不同器官皆要方開(kāi)培養(yǎng),培養(yǎng)24小時(shí)后觀察是否有細(xì)菌生長(zhǎng),通常魚(yú)的病癥是細(xì)菌引起的可在培養(yǎng)基上看到很純的菌落 ,也就是細(xì)菌的顏色大小外觀都是一樣的,接下來(lái)就要鑑定細(xì)菌的種類了,因?yàn)橹恢朗羌?xì)菌引起的是不夠的,細(xì)菌基本上分為陽(yáng)性菌跟陰性菌,這兩類有不同的治療藥物,所以至少要搞清楚是陽(yáng)性菌或陰性菌才能對(duì)癥下藥,接下來(lái)就是進(jìn)行革蘭氏染色以鑑定細(xì)菌是陽(yáng)性菌或陰性菌,一般的鰓部抹片或內(nèi)臟的抹片都可以做此染色,知道細(xì)菌是陽(yáng)性或陰性以后,就是做細(xì)部的確認(rèn)細(xì)菌的種類,目前一般檢驗(yàn)單位或?qū)嶒?yàn)室都使用商業(yè)的鑑定套組,在實(shí)驗(yàn)室常用的是API 20E,Microgen以及Biolog這三種鑒定系統(tǒng),這三種都是不同公司生產(chǎn)的快速鑒定系統(tǒng),當(dāng)然定系統(tǒng)有分腸內(nèi)菌專用,陽(yáng)性菌專用,陰性菌專用或是某類特殊菌屬專用的定系統(tǒng),一般都可以定到種,而也可以以傳統(tǒng)的生化特性來(lái)做分類, 依細(xì)菌的一些特性來(lái)做分類,但所花的時(shí)間較久也較麻煩,一般商業(yè)的定系統(tǒng)約24小時(shí)就可知道結(jié)果,最慢的也只要48小時(shí)就可以知道所分離的細(xì)菌是什么菌了,當(dāng)知道細(xì)菌的種類后,接下來(lái)就是做抗藥性試驗(yàn),這個(gè)試驗(yàn)可知道哪些抗生素可用來(lái)抑制細(xì)菌,這個(gè)結(jié)果可以當(dāng)做我們用藥的參考。
以上只簡(jiǎn)略介紹最基本的數(shù)碼顯微鏡魚(yú)病檢驗(yàn)流程,要證明引起該疾病的病源最好的結(jié)果是由病魚(yú)分離出來(lái)的病魚(yú),在以人為方式感染健康的魚(yú)同樣可以引起相同的癥狀,這樣才能確定該病原是該病癥的病原菌,當(dāng)然隨著研究者的領(lǐng)域會(huì)有不同的研究方向以及研究方法。 

魚(yú)病發(fā)生的初期

(一)、感染的跡象。受侵害的魚(yú)在硬物體上摩擦,合攏鰭。皮膚上覆蓋著發(fā)白的藍(lán)色不透明體,尤其是在關(guān)部和背鰭之間。如果鰓部受到侵害,呼吸的頻率顯著加快。在感染的晚期,皮膚表面腫脹然后脫落。

(二)、感染詳述。斜管蟲(chóng)是纖毛蟲(chóng),一種單細(xì)胞的、只有用魚(yú)病檢測(cè)顯微鏡能看得見(jiàn)的生物體,不均勻地覆蓋著茸毛,茸毛推動(dòng)蟲(chóng)體在水中前進(jìn)。使用中等倍數(shù)顯微鏡能看到斜管蟲(chóng),但是必須迅速采到標(biāo)本,因?yàn)樾惫芟x(chóng)在魚(yú)死后兩小時(shí)之內(nèi)就離開(kāi)了魚(yú)體。這種寄生蟲(chóng)首先侵襲受了傷的魚(yú),但是在擁擠的環(huán)境條件里傳染到健康的魚(yú)。斜管蟲(chóng)病使魚(yú)變得非常弱,嚴(yán)重的病例能對(duì)鰓造成長(zhǎng)久的損傷。斜管蟲(chóng)靠細(xì)胞分裂繁殖。

(三)、推薦的治療方法。如果魚(yú)比較強(qiáng)壯,對(duì)淡水魚(yú)類最好的治療方法是用3%的鹽水浸泡,讓魚(yú)呆在里面直到它們蜷縮起來(lái),然后迅速地把它們放回到它們自己的水族箱里。作為一種替代并且刺激性小治療方法,是將魚(yú)放入1%的鹽水中待10-15分鐘,然后把魚(yú)放回干凈的水里,治療熱帶魚(yú)溫度最好在28-30度。或者可以使用新型抗寄生蟲(chóng)處理劑。如果寄生蟲(chóng)留在沒(méi)有魚(yú)的、溫度在30度的水族箱里大約5天,它們就會(huì)死亡。但是還必須治療魚(yú)體上的寄生蟲(chóng)。

在用顯微鏡對(duì)病魚(yú)進(jìn)行檢測(cè)時(shí)的注意事項(xiàng):
        要用活的病魚(yú)或剛死的病魚(yú)進(jìn)行檢查。由于魚(yú)死亡后,寄生蟲(chóng)很快隨之死去,寄生于魚(yú)體的病原體又非常微小,死后往往很快改變形狀或腐爛分解,因此時(shí)間稍長(zhǎng)就很難確定其病原體。
取樣時(shí)要保持病魚(yú)魚(yú)體濕潤(rùn)。因魚(yú)體干燥后,寄生在病魚(yú)體表的寄生蟲(chóng)會(huì)同時(shí)被干掉,甚至連病魚(yú)的癥狀也會(huì)變得不明顯或無(wú)法辨認(rèn)。因此,應(yīng)將病魚(yú)裝在帶有原飼養(yǎng)水的桶或盆里拿出檢查。
顯微鏡做魚(yú)病檢查時(shí)的詳細(xì)方法:
          載玻片法適用于低倍率或高倍率魚(yú)病檢測(cè)顯微鏡檢查。方法是取下一小塊病灶組織或一小滴內(nèi)含物,放在干凈的載玻片上,滴入一小滴清水或鹽水,蓋上蓋玻片,輕輕地壓平,先在低倍率顯微鏡下檢查,分辨不清或可疑的可再調(diào)到高倍率下檢查。
          一般幾十微米大小的寄生蟲(chóng)(如鞭毛蟲(chóng))用高倍率檢測(cè),幾百微米的寄生蟲(chóng)(如車輪蟲(chóng))用低倍率檢測(cè)。
         玻片壓縮法 用兩片厚度約為3~4毫米,大小約6 x12厘米的玻片,先將要檢查的組織或者是器官的一部分以及粘液等,放在其中一片玻片上,滴上適量的清水或鹽水(注意體表部分或粘液用普通水,體內(nèi)器官或組織用0.56%的鹽水),用另一片玻片將其壓成透明的薄層,即可放到低倍顯微鏡下檢查。
應(yīng)該重點(diǎn)檢查的組織器官 魚(yú)的各個(gè)組織器官、血液都可能有病原體的寄生,但在生產(chǎn)實(shí)踐中,特別應(yīng)該重點(diǎn)檢查的部位是粘液、鰭條、鰓、腸胃、肝臟。

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